Компьютерный анализ сперматозоидов спустя 10 лет: ориентир для научного андрологического сообщества Европы

Компьютерный анализ сперматозоидов возможен в диапазоне концентраций от 510х10⁶ до 50100х10⁶. Чувствительность методики недавно удалось повысить благодаря усовершенствованию счетных камер и флюоресцентной окраски сперматозоидов, однако системы компьютерного анализа остаются дорогостоящими и требуют слишком тщательного, для рутинного метода, выполнения всех аналитических процедур.

Компьютерный анализ позволяет оценивать подвижность сперматозоидов почти по 20 наиболее характерным кинематическим параметрам, которые остаются постоянными в повторных эякулятах одного донора и позволяют наиболее достоверно различать мужчин с нормальной и нарушенной фертильностью. Система пригодна также для морфологического анализа сперматозоидов. Визуальный и компьютерный анализы взаимодополняют друг друга. Первый позволяет получать качественные и количественные данные независимо от концентрации и других характеристик сперматозоидов, которые ограничивают применение компьютерного анализа. Однако последний дает информацию, недоступную при визуальном анализе.

Влияние фибронектина на подвижность мужских сперматозоидов

Иммунофлюоресцентный и иммуноультраструктурный анализ выявил относительно широкое распространение фибронектинподобной иммунореактивности в головке сперматозоида и в тестикулярных сперматидах. Добавление антисыворотки в разведении 1:50 in vitro в среду жизнеспособных сперматозоидов, содержавшую фибронектин, значительно усиливало их подвижность, тогда как фибронектин, выделенный из семенной жидкости, подавлял ее пропорционально концентрациям. Подвижные сперматозоиды полностью отсутствовали при концентрации фибронектина 0,180,5 мг в 1 мл эякулята. В семенной жидкости бесплодных мужчин концентрация фибронектина колебалась от 0,8 до 1000 мкг/мл. У лиц с олигоастенотетразооспермией установлена достоверная отрицательная корреляция между концентрацией фибронектина и подвижностью сперматозоидов, отсутствовавшая при расширении вен семенного канатика или гипогонадизме.

Антитела к сперматозоидам у мальчиков препубертатного возраста, получавших химиотерапию по поводу злокачественных и доброкачественных заболеваний, и у мальчиков с аномалиями развития полового тракта

В сыворотке крови здоровых мальчиков в возрасте 1,213 лет аутоантитела к сперматозоидам отсутствовали. Положительные по ним сыворотки получены от 9,8% обследованных детей с лимфобластной лейкемией, злокачественной лимфомой, опухолью Вильмса, кистозным фиброзом или врожденными пороками развития полового тракта (крипторхизм, паховая грыжа, перекручивание пуповины и гипоспадия). У 8,7% детей этой группы титры антител, обнаруженных в реакции агглютинации, колебались от 1:32 до 1:128. По данным иммуноадсорбционной методики, антитела к сперматозоидам у 5,3% детей были представлены иммуноглобулинами G. У 4,1% антитела обнаружены обоими методами. Среди 26 детей с аутоантителами 24 имели аномалии развития полового тракта и 2 страдали лейкемией с тестикулярной инфильтрацией. Лечение не влияло на наличие и титры антител. Полученные результаты свидетельствуют о повышенной частоте встречаемости аутоантител к сперматозоидам у детей с мочеполовыми расстройствами и о необходимости учитывать их присутствие при оценке клинического состояния репродуктивной системы и гематотестикулярного барьера в детском возрасте.

Участвует ли гонадотропная система в патогенезе синдрома только клеток Сертоли?

У мужчин с синдромом только клеток Сертоли биологическая и иммунологическая активность сывороточного ФСГ (фолликулостимулирующий гормон) in vitro была значительно выше нормальной. Иммунореактивность коррелировала с биоактивностью и зависела от степени поражения и общего объема яичек. Установлена также отрицательная корреляция между концентрациями сывороточных ФСГ и ингибина. Относительное содержание слабогликозилированных изоформ ФСГ при синдроме только клеток Сертоли составляло 6,7% по сравнению с 3,6% в контроле. Структурные изменения рецепторов ФСГ не обнаружены. Делается вывод, что нарушения сперматогенеза и повышение концентрации ФСГ у мужчин с синдромом только клеток Сертоли не связаны с изменениями биологической активности ФСГ или его рецепторов и обусловлены компенсаторным усилением секреции ФСГ нормально функционирующей системой гипофизполовые железы.

Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов с использованием сперматозоидов из яичек и их придатков, полученных хирургическим путем, при обструкционной и необструкционной азооспермии

При использовании в циклах ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида) сперматозоидов из придатков яичек частота оплодотворения в пересчете на инъецированный ооцит в метафазе II и частота наступления клинической беременности на цикл составляли соответственно 60,4 и 25%. При использовании тестикулярных сперматозоидов от мужчин с обструкционной азооспермией частота оплодотворения и наступления беременности равнялась соответственно 59,1 и 35,1%, а в случаях необструкционной азооспермии 58,7 и 24,3%. Не установлено достоверных различий частоты оплодотворения и наступления беременности при использовании сперматозоидов из яичек и их придатков при обструкционной азооспермии, а также при сравнении врожденной и приобретенной непроходимости. Частота оплодотворения и наступления клинической беременности при необструкционной азооспермии была в целом ниже, чем при обструкционной.

Усовершенствованная методика сохранения ультраструктуры человеческих сперматозоидов путем введения бетаина в первичный фиксатор

Предложена модифицированная методика подготовки проб спермы для электронно-микроскопического исследования, включающая фильтрацию через миллипоровый фильтр (0,45 мкм) и последующее выдерживание сперматозоидов в течение часа в фиксирующим растворе (среда HEPES или какодилатный буфер), содержащем 3% глютаральдегида, 1% формальдегида и 21 мМ бетаина. Преимущество описанной методики состоит в значительном улучшении видимой ультраструктуры сперматозоидов при относительно слабом повышении осмотического давления фиксирующего раствора. Бетаин выполняет осмопротекторную функцию на начальных стадиях фиксации. Методика пригодна для подготовки проб спермы, полученной от страдающих олигозооспермией мужчин, благодаря концентрации сперматозоидов в процессе фильтрования и, кроме того, может использоваться для фиксации сперматозоидов после отмывания из спермы с повышенной вязкостью.

Проблемы репродукции, 1-1998, с.71-72