|
Рыжко И.В., Самоходкина Э.Д., Цураева Р.И., Щербанюк А.И., Пасюков В.В. Научно-исследовательский противочумный институт, Ростов-на-Дону
В начало...
Высокая терапевтическая эффективность цефтриаксона, цефтазидима, цефотаксима, азтреонама при экспериментальной чумной инфекции, вызванной бета-лактамазопродуцирующими штаммами возбудителя с R-плазмидами RP-1, R57b, R40a, коррелирует с их антибактериальной активностью в опытах in vitro. Терапевтическая активность сульбактама/ампициллина регистрируется при инфекции, обусловленной возбудителем с R-плазмидами R57b и R40a (курс 7 дней), но оказывается сниженной в случае использования заражающего штамма с плазмидой RP-1 (бета-лактамаза ТЕМ-2). Цефоперазон не эффективен при экспериментальной чуме, вызванной микроорганизмами с плазмидами RP-1 и R57b (бета-лактамазы ТЕМ-2 и ОХА-3). Цефтриаксон среди изученных антибиотиков является препаратом выбора для этиотропной терапии чумы, вызванной не только типичными штаммами возбудителя, но и вариантами с плазмидной устойчивостью к пенициллинам.Ключевые слова:
Устойчивость возбудителей инфекционных заболеваний к антибактериальным препаратам является одной из важнейших проблем клиники и экспериментальной медицины. Наибольшую значимость имеет широкое распространение среди микроорганизмов множественной лекарственной устойчивости, детерминируемой включением трансмиссивных R-плазмид; постоянно увеличивается число микроорганизмов с R-плазмидами, несущими маркеры резистентности к природным, полусинтетическим пенициллинам и другим беталактамам. Устойчивость бактерий с R-плазмидами определяется их способностью продуцировать бета-лактамазы различных классов. С этим связано внедрение в практику лечения инфекционных заболеваний фиксированных комбинаций полусинтетических пенициллинов с ингибиторами бета-лактамаз, цефалоспоринов III и IV поколений, характеризующихся устойчивостью к действию широкого круга бета-лактамаз.
Если в 80-е годы при лечении чумы у людей с успехом применялся ампициллин [1], то в последнее десятилетие стали необходимыми исследования по внедрению более эффективных противочумных препаратов. Экспериментально обоснована возможность использования для целей профилактики и лечения чумы азлоциллина [2], сульбактама/ампициллина [3], азтреонама [4], цефалоспоринов III поколения [5]. Эти результаты получены при экспериментальной чуме белых мышей, вызванной чувствительными к антибиотикам штаммами чумного микроба. В то же время имеются данные, свидетельствующие о сохранении высокой вирулентности у штаммов чумного микроба с R-плазмидами множественной лекарственной устойчивости [6-8]. Возможность появления штаммов возбудителя чумы с R-плазмидами, детерминирующими продукцию бета-лактамаз, делает необходимым сравнительную оценку эффективности беталактамов при экспериментальной инфекции, вызванной устойчивыми к пенициллинам штаммами возбудителя, что и явилось целью настоящего исследования.
Штаммы. В опытах использовали природный антибиотикочувствительный штамм чумного микроба 231 (708) и его высоковирулентные трансконъюганты с R-плазмидами: 231RP-1, 231R40а и 231R57b, несущими маркеры резистентности к пенициллинам*. Значения ЛД50 штаммов колебались в пределах 5-10 микр. клеток по стандарту мутности ГИСК им. Л.А. Тарасевича. В экспериментах in vitro дополнительно использовали вакцинный штамм EV76 и трансконъюганты EVRP-1, EVR57b, EVR40a.
Антибиотики. Использовали: ампициллин , сульбактам/ампициллин, азтреонам, цефоперазон, цефотаксим, цефтазидим, цефтриаксон. Дозы антибиотиков в опытах на мышах рассчитывали, исходя из среднесуточной дозы для человека [9].
Определение чувствительности штаммов чумного микроба к антибиотикам проводили методом двукратных серийных разведений в плотной питательной среде (агар Хоттингера, рН 7,1 0,1). Посевная доза культур составляла 107 микр.клеток/мл.
Эффективность препаратов при профилактике и лечении чумы изучали в опытах на беспородных белых мышах массой 18-20 г, инфицированных подкожно суспензиями суточных агаровых культур в дозе 104 микр. клеток по стандарту мутности, что составляло ~1000 ЛД50. С профилактической целью антибиотики начинали вводить через 5 ч после заражения, с лечебной - через 24 ч. Препараты вводили один раз в сутки в течение 5-7 дней. Срок наблюдения за животными составлял 30 дней, в течение которого осуществляли бактериологический контроль эффективности этиотропной терапии. В каждой группе использовали не менее 20 животных.
Для статистической обработки результатов экспериментов применяли таблицы А. Боярского [10].
Опыты in vitro показали, что все взятые для исследования R+-штаммы возбудителя чумы обладали высокой степенью устойчивости к ампициллину (МПК 8000-16000 мкг/мл), но сохраняли чувствительность к цефтриаксону, цефтазидиму, цефотаксиму и азтреонаму на уровне антибиотикочувствительных культур Yersinia pestis 231 и EV76 (МПК 0,01-0,05 мкг/мл). Цефалоспорин III поколения цефоперазон оказался менее активным в отношении бета-лактамазопродуцирующих штаммов возбудителя чумы: значения его МПК составляли 100-400 мкг/мл в зависимости от R-плазмиды, определяющей в клетке продукцию инактивирующего антибиотик фермента. Наименьшую активность цефоперазон проявлял в отношении штаммов чумного микроба 231RP-1 и EVRP-1 (продуценты бета-лактамазы ТЕМ-2), для которых значение МПК равнялось 400 мкг/мл, несколько большую (МПК 100 мкг/мл) - в отношении штаммов возбудителя 231R57b, EVR57b (бета-лактамаза ОХА-3) и культур с плазмидой R40a (данными о бета-лактамазе не располагаем).
Ингибитор бета-лактамаз сульбактам в составе фиксированной комбинации с ампициллином подавлял активность ферментов, что выражалось в снижении устойчивости к антибиотику. Значения МПК сульбактама/ампициллина для штаммов чумного микроба 231R57b, 231R40a, EVR57b и EVR40a составляли 40 мкг/ мл; для штаммов 231RP-1 и EVRP-1 - 400 мкг/ мл, что свидетельствует о повышении чувствительности к ампициллину в комбинации с сульбактамом у штаммов с плазмидной устойчивостью к пенициллинам соответственно в 400, 200 и 40 раз (табл. 1).
| Таблица 1. Минимальная подавляющая концентрация (в мкг/мл) беталактамов в отношении штаммов чумного микроба с плазмидной устойчивостью к пенициллинам |
| Антибиотики |
Штамм чумного микроба |
| 231 исходный |
231RP-1 |
231R57b |
231R40a |
EV76 |
EVRP-1 |
EVR57b |
EVR40a |
| Ампициллин |
2,0 |
16000 |
16000 |
8000 |
2,0 |
16000 |
16000 |
800 |
| Сульбактам/ампициллин |
4,0 |
400 |
40 |
40 |
4,0 |
400 |
40 |
40 |
| Азтреонам |
0,025 |
0,05 |
0,025 |
0,025 |
0,05 |
0,05 |
0,05 |
0,05 |
| Цефоперазон |
0,25 |
400 |
100 |
100 |
0,5 |
400 |
100 |
100 |
| Цефотаксим |
0,01 |
0,01 |
0,01 |
0,01 |
0,01 |
0,01 |
0,01 |
0,01 |
| Цефтазидим |
0,05 |
0,025 |
0,05 |
0,05 |
0,025 |
0,05 |
0,05 |
0,05 |
| Цефтриаксон |
0,01 |
0,05 |
0,025 |
0,01 |
0,01 |
0,05 |
0,05 |
0,025 |
Далее...
Написать комментарий
|
