|
Сидоренко С.В., Резван С.П., Грудинина С.А., Кротова Л.А., Стерхова Г.В. Государственный научный центр по антибиотикам, Москва
В начало...
Изучена антибиотикочувствительность 446 штаммов энтерококков (386 штаммов Enterococcus faecalis, 48 - Enterococcus faecium, 12 - других видов), выделенных в 9 лечебных учреждениях Москвы и Санкт-Петербурга. Все изученные штаммы энтерококков были полностью чувствительны к ванкомицину. Среди E.faecalis 84 и 85% штаммов были чувствительны к ампициллину и ампициллин/сульбактаму соответственно (продукции бета-лактамаз обнаружено не было); частота высокого уровня резистентности к аминогликозидам составила: к стрептомицину 44%, к гентамицину - 25%; к ципрофлоксацину чувствительность сохраняли 75% штаммов. Среди E.faecium и редких видов энтерококков более 70% штаммов были устойчивы к ампициллину и ампициллин/сульбактаму. Частота высокого уровня резистентности к аминогликозидам превосходила 60%, к ципрофлоксацину чувствительность сохраняли 17 и 25% штаммов.Ключевые слова:
Микроорганизмы рода Enterococcus входят в состав нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта (в содержимом толстой кишки их концентрация достигает 107 КОЕ/г) и характеризуются невысокой патогенностью. Значение энтерококков в патологии человека определяется, в основном, их ролью в качестве этиологических агентов госпитальных инфекций. Выделяют энтерококки, чаще в ассоциации с другими микроорганизмами (Enterobacteriaceae, Bacteroidaceae и др.), при инфекциях мочевыводящих путей, при инфекционных осложнениях после интраабдоминальных и других хирургических вмешательств (с возможным развитием бактериемии), при подострых бактериальных эндокардитах. К факторам риска развития энтерококковых инфекций относятся тяжелые сопутствующие заболевания, длительная и интенсивная антибактериальная терапия, период новорожденности, характеризующийся повышением риска развития энтерококковой бактериемии. В США в 1990-1992 гг. энтерококки занимали второе место как этиологические агенты нозокомиальных инфекций мочевыводящих путей и третье место в этиологии раневых и нозокомиальных генерализованных инфекций [1-3].
Наиболее важной, с практической точки зрения, особенностью энтерококков является их чувствительность к ограниченному спектру антибактериальных препаратов, при этом ни один из доступных в клинике антибиотиков не оказывает на них бактерицидное действие. Стандартной схемой лечения энтерококковых эндокардитов и генерализованных инфекций является сочетанное применение бензилпенициллина (или ампициллина) с аминогликозидами (стрептомицином или гентамицином) [4, 5].
Альтернативными и наиболее эффективными средствами лечения энтерококковых инфекций являются гликопептидные антибиотики (ванкомицин, в частности). Определенное значение в лечении энтерококковых инфекций имеют фторхинолоны.
Однако проблема лечения энтерококковых инфекций осложняется тем, что у энтерококков формируется и приобретает распространение резистентность даже к ограниченному кругу тех антибиотиков, к которым эти микроорганизмы природно чувствительны.
Целью настоящего исследования являлось изучение уровня чувствительности энтерококков, выделенных в лечебных учреждениях Москвы и Санкт-Петербурга, к клинически значимым антибиотикам.
Согласно рекомендациям Национального комитета по клиническим и лабораторным стандартам США (NCCLS) оценивать чувствительность энтерококков следует только к тем препаратам, для которых доказана клиническая эффективность [6]. Исходя из этого, у клинических штаммов энтерококков обычно определяется их чувствительность к бензилпенициллину (или ампициллину), ванкомицину и хинолонам, а также выявляется уровень их резистентности к аминогликозидам.
В многоцентровом исследовании антибиотикочувствительности энтерококков приняли участие 9 лечебных учреждений различного профиля Москвы и Санкт-Петербурга. В Москве - Онкологический научный центр РАМН (ОНЦ), Центральный НИИ травматологии и ортопедии им. Н.Н. Приорова (ЦИТО), НИИ гематологии (НИИГ), Городская клиническая больница N 15 (ГКБ15), Детская городская больница N 13 им. Н.Ф. Филатова (ДГКБ13), Клиническая больница Управления делами Президента РФ (КБ УПД); в Санкт-Петербурге - Военно-медицинская академия (ВМА), Городская клиническая больница N 2 (ГКБ2), Медико-санитарная часть N 122 (МСЧ122). В период с сентября 1995 г. по май 1996 г. в бактериологических лабораториях перечисленных учреждений было отобрано приблизительно по 50 последовательных штаммов энтерококков, выделенных из патологического материала, полученного от больных, находящихся на стационарном лечении. Идентификацию энтерококков проводили по общепринятым методам.
Выделенные штаммы энтерококков передавали в Государственный научный центр по антибиотикам (ГНЦА), где проверялась чистота выделенных культур с использованием среды Enterococcosel Agar ("BBL") и их идентификация (API 20Strep, "BioMerieux"). Культуры хранили в полужидком агаре при 4?С.
Культуры, контаминированные посторонними микроорганизмами, в дальнейшие исследования не включали.
Исследовали чувствительность энтерококков к следующим антибиотикам: ампициллину, ампициллин/сульбактаму, гентамицину, стрептомицину, ципрофлоксацину и ванкомицину. Оценивали также продукцию бета-лактамаз с помощью дисков Cefinase ("BBL").
Для характеристики антибиотикочувствительности энтерококков определяли величину МПК перечисленных антибиотиков. Интерпретацию результатов проводили в соответствии с рекомендациями и критериями NCCLS [6]. В 96-лунковых планшетах для иммунологических исследований готовили серии двукратных разведений антибиотиков в среде Mueller-Hinton Broth II ("BBL") в объеме 50,0 мкл. Каждый антибиотик был представлен концентрациями, позволяющими дифференцировать микроорганизмы по степени чувствительности в соответствии с критериями NCCLS. (Планшеты с растворами антибиотиков замораживали при -70?С, хранили не более 2 нед).
Для приготовления инокулята из изолированных колоний энтерококков готовили суспензию по стандарту McFarland 0,5 в дистиллированной воде. Далее суспензию разводили в среде Muеller-Hinton Broth II ("BBL") до концентрации 106 КОЕ/мл. Приготовленную суспензию вносили по 50,0 мкл в лунки планшет (предварительно размороженных). Инокулированные планшеты инкубировали в течение 18 ч при 35-37?С. За МПК принимали наименьшую концентрацию антибиотика, при которой отсутствовал видимый рост микроорганизмов. В качестве контроля использовали референтный штамм Enterococcus faecalis ATCC 29212.
Для статистической обработки данных использовали программу WHONET4.
В исследование было включено 446 штаммов энтерококков (Enterococcus faecalis - 386, Enterococcus faecium - 48, Enterococcus spp. - 12).
В табл. 1 представлены данные о количестве штаммов, выделенных в отдельных учреждениях, и о видовом составе микроорганизмов.
| Таблица 1. Видовой состав энтерококков, выделенных в различных учреждениях |
| Учреждение |
Всего |
E.faecalis |
E.faecium |
Enterococcus spp. |
| абс. |
% |
абс. |
% |
абс. |
% |
| ОНЦ |
50 |
43 |
86 |
6 |
12 |
1 |
2 |
| НИИГ |
43 |
39 |
90,7 |
3 |
7 |
1 |
2,3 |
| ЦИТО |
59 |
51 |
86,4 |
7 |
11,7 |
1 |
1,9 |
| ДГKБ13 |
60 |
39 |
65 |
19 |
31,7 |
2 |
3,3 |
| ГKБ15 |
59 |
52 |
88,1 |
4 |
6,8 |
3 |
5,1 |
| KБ УПД |
50 |
49 |
98 |
0 |
0 |
1 |
2 |
| ВМА |
48 |
45 |
93,8 |
3 |
6,3 |
0 |
0 |
| ГKБ2 |
40 |
35 |
87,5 |
3 |
7,5 |
2 |
5 |
| МСЧ122 |
37 |
33 |
89,2 |
3 |
8,1 |
1 |
2,7 |
| Всего |
446 |
386 |
86,5 |
48 |
10,8 |
12 |
2,7 |
Как следует из табл. 1, видовой состав энтерококков, выделенных в различных учреждениях, существенно не различался. Единственным исключением является сравнительно высокая доля E.faecium среди микроорганизмов, выделенных в ДГКБ13 (31,7%). К редко выделявшимся видам энтерококков относились E.hirae, E.avium, E.durans, E.gallinarum, E.casseliflavus.
Распределение штаммов по видовому составу и источникам выделения представлены в табл. 2.
Как следует из табл. 2, частота выделения E.faecalis и E.faecium из различных источников также была весьма сходной. К особенностям можно отнести несколько большую частоту выделения E.faecium из фекалий и меньшую из мочи, цервикального канала и других источников.
| Таблица 2. Видовой состав энтерококков, выделенных из различных источников |
| Источник выделения |
Всего |
E.faecalis |
E.faecium |
Enterococcus spp. |
| абс. |
% |
абс. |
% |
абс. |
% |
абс. |
% |
| Kровь, ликвор |
13 |
3,0 |
10 |
2,7 |
3 |
5,3 |
0 |
0 |
| Желчь |
3 |
0,6 |
3 |
0,7 |
0 |
0 |
0 |
0 |
| Фекалии |
75 |
16,8 |
55 |
14,2 |
19 |
39,5 |
1 |
8,3 |
| Моча |
101 |
22,6 |
87 |
22,7 |
10 |
21,1 |
4 |
33,4 |
| Мокрота |
14 |
3,2 |
13 |
3 ,5 |
0 |
0 |
1 |
8,3 |
| Зев |
43 |
9,6 |
39 |
10,2 |
4 |
7,9 |
0 |
0 |
| Раневое отделяемое, гной |
40 |
9,0 |
38 |
9,9 |
1 |
2,7 |
1 |
8,3 |
| Цервикальный канал, влагалище |
116 |
25,8 |
107 |
27,9 |
6 |
13,1 |
3 |
25,0 |
| Другие |
41 |
9,4 |
34 |
8,9 |
5 |
10,5 |
2 |
16,7 |
Безусловно патогенетически значимым является выделение энтерококков из крови и ликвора, в несколько меньшей степени - из желчи. Из мочи энтерококки в подавляющем большинстве случаев выделяли в ассоциации с другими микроорганизмами, но их роль в патогенезе инфекций мочевыводящих путей общепризнана.
В определенной степени так же можно оценивать и выделение энтерококков из раневого отделяемого при гнойных процессах. Обнаружение энтерококков в мокроте и зеве скорее свидетельствует о микроэкологических нарушениях в макроорганизме, чем об их патогенетической роли в инфекции дыхательных путей. Выделение энтерококков из цервикального канала и влагалища также имеет весьма сомнительное значение для этиологической диагностики инфекционно-воспалительных заболеваний органов малого таза.
Поскольку энтерококки являются компонентом нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта, то их обнаружение в фекалиях, в подавляющем большинстве случаев, не имеет диагностической ценности.
Далее...
Написать комментарий
|
