Современные возможности изучения свойств штаммов Helicobacter pylori больных с заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки
А. А. Кишкун, С. Л. Арсенин
Медицинский центр Банка России, Москва
(Продолжение)В начало...
Результаты и их обсуждение
Частота обнаружения HP различными методами приведена в таблице 1.
Таблица 1. Частота обнаружения HP различными методами у обследованных |
Наименование исследования |
Группы больных, частота обнаружения HP, % |
ЯБДК, п=63 |
ЯБЖ, n=11 |
ХГ, n=15 |
Без гастродуоденальной патологии, n=21 |
Гистологическое |
85,7 |
81,2 |
73,3 |
23,8 |
Бактериологическое |
79,3 |
72,7 |
53,3 |
19,0 |
Уреазный тест |
82,5 |
81,8 |
60,0 |
28,5 |
ПЦР: |
UreC ген HP |
84,1 |
72,7 |
60,0 |
23,8 |
СаgА ген HP |
80,9 |
81,8 |
53,3 |
14,3 |
Определение антител к СаgА белку HP |
57,1 |
63,6 |
33,3 |
19,0 |
Western-blot: |
антитела к СаgА белку |
90,5 |
90,9 |
60,0 |
28,5 |
маркер текущей инфекции |
87,3 |
81,8 |
53,3 |
23,8 |
Как видим из таблицы, частота распространения HP у больных ЯБДК, ЯБЖ ХГ, подтвержденная как гистологическим исследованием (85,7 %, 81,2 %, 73,3 % соответственно), так и другими методами, соответствует уже известным литературным данным [3, 4]. Наиболее часто HP обнаруживается всеми приведенными методами при ЯБДК и ЯБЖ. Это подтверждает мнение о высокой корреляции между язвенной болезнью и HP.
Обращает на себя внимание и тот факт, что антитела к СаgА белку у больных ЯБДК обнаруживаются в 1,5 раза (у 57,1 % больных), а у пациентов с ЯБЖ в 1,9 раза (у 63,6 % больных) чаще, чем у больных с хроническим гастритом (у 33,3 % пациентов). Приведенные данные согласуются с мнением о том, что штаммы HP, обладающих СаgА+ фенотипом, чаще всего обнаруживают при язвенной болезни (у 90 % больных язвенной болезнью и лишь у 48 % больных хроническим гастритом) [8, 9, 11]. Тот факт, что антитела к СаgА белку в наших исследованиях выявляются значительно реже, чем по данным литературы, по-видимому, связан с низкой аналитической чувствительностью использованных тест-систем "CagAssay", так как частота выявления антител к СаgА белку при использовании метода Western-blot соответствует литературным источникам. Другой возможной причиной низкой выявляемости антител к СаgА белку может быть гетерогенность штаммов HP, и как следствие использование в тест-системах "CagAssay" антигенов, которые реже встречаются у больных в России, по сравнению с западными странами.
Результаты серотипирования методом Western-blot и определением антител к СаgА белку HP методом ИФА представлены в таблице 2 и рис 1-2 .
Как видно из таблицы, наиболее часто у больных язвенной болезнью выявлялись серотипы инфекции HP 1 типа (77,7 % у больных ЯБДК и 81,8% у больных ЯБЖ). У больных ХГ частота выявления HP 1 серотипа составила 40,0 %, а у больных без гастродуоденальной патологии лишь 9,5 %. Результаты наших исследований близки к полученным J.C. Atherton и соавт. [9], N. Figura [11]. Особо следует подчеркнуть, что у пациентов с Ib и II серотипами, бактерии HP в СОЖ гистологическим и бактериологическим методами выявлены не были, что согласуется с результатами других исследователей [7, 15]. Полученные данные указывают на то, что штаммы HP, продуцирующие СаgА и VacA белки (I серотип), чаще встречаются у больных язвенной болезнью и, по-видимому, играют важную роль в повреждении СО. В связи с этим определение серотипа инфекции HP может быть использовано в качестве показателя риска возникновения язвенной патологии у инфицированных пациентов.
Таблица 2.Cеротипы HP и частота их обнаружения у обследованных лиц |
Серотип |
Группы больных, частота обнаружения HP, % |
ЯБДК, n=63 |
ЯБЖ, n=11 |
ХГ, n=15 |
Без гастродуоденальной патологии, n=21 |
I (СаgА+, VacA+) |
77,7 |
81,8 |
40,0 |
9,5 |
Ia (СаgА+, VacA-) |
11,1 |
9,1 |
13,3 |
9,5 |
Ib (СаgА-, VacA+) |
1,6 |
0 |
0 |
4,8 |
II (СаgА-, VacA-) |
0 |
0 |
6,7 |
4,8 |
Антитела к СаgА |
57,1 |
63,9 |
33,3 |
19,0 |
|
Рис.1 Отрицательный (a) и положительный (б) контроли в Wtstern-blot |
Несмотря на то, что частота выявления антител к СаgА белку HP с использованием тест-систем "CagAssay" во всех группах больных ниже, чем при применении Westem-blot, тем не менее у больных ЯБДК (57,1 %) и ЯБЖ (63,6 %) они определяются чаще, чем при ХГ (33,3 %) и у пациентов без патологии желудочно-кишечного тракта (19,0 %).
Таким образом, методы определения антител к CagA белку НР и Western-blot могут быть использованы для установления серотипа НР (CagA+ или CagA-) и определения прогноза течения НР-ассоциированных заболеваний.
Если CagA белок НР и антитела к нему являются маркером цитотоксичности возбудителя, то ген CagA имеет более широкое значение, - он является маркером так называемого "остова патогенности" - участка ДНК, в котором расположен ряд генов, ответственных за вирулентность и патогенность НР. Эти гены сейчас активно изучаются и возможно, экспрессия ряда из них сможет объяснить особенности клинического течеения инфекции и причины длительного персистирования НР в организме больного.
Результаты генотипирования штаммов НР методом ПЦР представлены на рис. 3 и в табл. 3.
Таблица 3. Генотипы НР и частота обнаружения у обследованных лиц |
Генотип |
Группы больных, частота обнаружения серотипа HP, % |
ЯБДК, n=63 |
ЯБЖ, n=11 |
ХГ, n=15 |
Без гастродуоденальной патологии, n=21 |
UreC ген НР |
84,1 |
72,7 |
60,0 |
23,8 |
CagA ген НР |
80,9 |
81,8 |
53,3 |
14,3 |
Как видно из таблицы, CagA ген НР значительно чаще выявляется у больных ЯБДК (80,9%) и ЯБЖ (81,8%), чем у пациентов с ХГ (53,3%) и больных без гастродуоденальной патологии (14,3%). Результаты наших исследований совпадают с данными литературы [2, 8, 11].
|
Рис. 2. Графическое изображение результатов серотипирования НР методом Western-blot |
|
Рис. 3. Результаты ПЦР клинических образцов с праймерами к генам UreC и CagA. М - маркер молекулярных масс pUC19/Msp1;
Ok - отрицательный контроль;
Kure - положительный контроль на ген UreC;
Kcag - положительный контроль на ген CagA. 1-89 - клинические образцы. |
Далее...
Написать комментарий
|