Документ взят из кэша поисковой машины. Адрес
оригинального документа
: http://kodomo.cmm.msu.ru/~lu.andreeva/structurealign.html
Дата изменения: Thu Apr 16 23:37:21 2009 Дата индексирования: Tue Oct 2 05:17:46 2012 Кодировка: Windows-1251 |
В качестве исходного материала нам былb даны последовательности участков двух белков и пространственное наложение структур этих участков:
Опираясь на эти данные, вручную было построено выравнивание этих последовательностей и раскрашено в программе Genedoc.
Стоит отметить, что нумерация аминокислотных остатков в файле пространственного наложения (5_6.pdb)
не совпадала с нумерацией аминокислот в файлах с аминокислотными последовательностями, а некоторые остатки, присутствовавшие в пространственной структуре,
не обнаруживались в файлах с последовательностями (5.fasta, 6.fasta). С помощью визуализатора RasMol было установлено соответствие
между пространственной структурой и последовательностью, в результате чего было построено следующее выравнивание:
На рисунке в рамку взят фрагмент выравнивания, соответствующий расхождению пространственных структур (см. выше). Очевидно, пространственное выравнивание не полностью соответствует выравниванию вручную, поскольку
в последнем на участке пространственного расхождения обнаруживаются положительные замены и совпадения аминокислот. Это можно объяснить особенностями получения пространственных структур, а также большим влиянием несовпадающих, чем совпадающих, аминокислот на структуру.
Файл с выравниванием в формате .msf можно найти здесь.
Построим выравнивание тех же последовательностей с помощью программы needle пакета Emboss: needle.msf. Подробное описание того, как это делается, присутствует на этой странице: пройти по ссылке.
Применим стандартные параметры выравнивания (штраф за открытие гэпа - 10, за его продолжение - 0.5) и получи следующую картину:
Как видно из предыдущих рисунков, выравнивания (полученное вручную и с помощью программы) идентичны. Поскольку первое выравнивание вручную опиралось на пространственное строение, а второе - на математические методы, можно заключить, что программа needle создает качественные и биологически обоснованные выравнивания. Конечно, одного случая совпадения пространственного и "математического" выравнивания недостаточно, чтобы сделать столь громкий вывод, однако полное совпадение может оказаться случайным при ничтожной вероятности.