Документ взят из кэша поисковой машины. Адрес оригинального документа : http://kodomo.cmm.msu.ru/~bennigsen/term4/prac7.html
Дата изменения: Sun Apr 5 01:07:42 2009
Дата индексирования: Tue Oct 2 10:15:34 2012
Кодировка: Windows-1251
Yuri Pekov, Term 4, Practice 7

Учебный сайт студента ФББ МГУ Пекова Юрия

Главная
Новости
Полезные ссылки
Контакты
Обо мне
Мои работы

Занятие 7. Классификация функций. Коды ферментов

Обязательные задания

  1. Объяснение заданного кода фермента
  2. Заданный мне код фермента - EC 2.3.1.61.
    Расшифровка каждого пункта кода:

    • EC 2: трансферазы (transferases)
    • EC 2.3: ацилтрансферазы (acyltransferases)
    • EC 2.3.1: перенос любых групп, кроме аминоацильных (transferring groups other than amino-acyl groups)
    • EC 2.3.1.61: дигидролипоиллизиновая сукцинилтрансфераза (dihydrolipoyllysine-residue succinyltransferase)

  3. Сравнение последовательности ферментов с одинаковым кодом из эволюционно далеких организмов
  4. Для поиска в базе UniProt с помощью SRS фермента EC 2.3.1.61 в организмах бактерии Escherichia coli K-12, археи Methanococcus jannaschii и человека я применил следующий запрос:
    ((([uniprot-AllText:EC*] & [uniprot-AllText:2.3.1.61*]) | [uniprot-AllText:EC 2.3.1.61*]) & (([uniprot-ID:*_ECOLI*] | [uniprot-ID:*_HUMAN*]) | [uniprot-ID:*_METJA*])) Однако у Methanococcus jannaschii фермента с таким кодом не оказалось, более того, я не нашел его во всем царстве Археев. Тогда я взял царство Грибы, а из него вид Saccharomyces cerevisiae. В нем нужный фермент нашелся.
    В каждом из трех организмов был найдет один указанный фермент.

    Сравнение доменной структуры найденных белков:

        Фермент 1 (Escherichia coli (strain K12), P0AFG6) Фермент 2 (Saccharomyces cerevisiae, P19262) Фермент 3 (Homo sapiens, P36957)
      Идентификатор, название домена Pfam Положение в последовательности Положение в последовательности Положение в последовательности
    Домен 1 PF00198, 2-oxoacid_dh 173-403 232-462 219-451
    Домен 2 PF00364, Biotin_lipoyl 4-77 74-147 71-143


    Для выяснения родственных связей между последовательностями я решил сделать девять парных выравниваний: для каждой из трех возможных пар ферментов сделано выравнивание двух доменов и последовательности в целом. Парные выравнивания проводились с помощью программы needle. Результаты представлены в таблице:

      ODO2_ECOLI & ODO2_YEAST ODO2_ECOLI & ODO2_HUMAN ODO2_YEAST & ODO2_HUMAN
    Последовательность белка в целом Length: 496
    Identity: 175/496 (35.3%)
    Similarity: 250/496 (50.4%)
    Gaps: 124/496 (25.0%)
    Length: 486
    Identity: 188/486 (38.7%)
    Similarity: 251/486 (51.6%)
    Gaps: 114/486 (23.5%)
    Length: 494
    Identity: 209/494 (42.3%)
    Similarity: 276/494 (55.9%)
    Gaps: 72/494 (14.6%)
    Домен PF00198 Length: 231
    Identity: 133/231 (57.6%)
    Similarity: 179/231 (77.5%)
    Gaps: 0/231 ( 0.0%)
    Length: 233
    Identity: 139/233 (59.7%)
    Similarity: 178/233 (76.4%)
    Gaps: 2/233 ( 0.9%)
    Length: 233
    Identity: 142/233 (60.9%)
    Similarity: 177/233 (76.0%)
    Gaps: 2/233 ( 0.9%)
    Домен PF00364 Length: 74
    Identity: 23/74 (31.1%)
    Similarity: 39/74 (52.7%)
    Gaps: 0/74 ( 0.0%)
    Length: 74
    Identity: 30/74 (40.5%)
    Similarity: 42/74 (56.8%)
    Gaps: 1/74 ( 1.4%)
    Length: 74
    Identity: 27/74 (36.5%)
    Similarity: 42/74 (56.8%)
    Gaps: 1/74 ( 1.4%)


    Как видно из таблицы, все найденные нами последовательности и домены достаточно близки друг други, и следовательно, гомологичны как белки трех организмов в целом, так и тройки доменов по отдельности.


©Пеков Юрий, 2007-2008