|
Документ взят из кэша поисковой машины. Адрес
оригинального документа
: http://herba.msu.ru/russian/departments/higher_plants/kurse/2.html
Дата изменения: Fri Apr 15 12:01:30 2005 Дата индексирования: Tue Oct 2 06:46:22 2012 Кодировка: koi8-r |
Микротехника
Методы исследования растительной клетки. Общая схема обработки материала при изготовлении временных и постоянных цитологических препаратов (срезы, мазки, давленые и тотальные препараты).
Подбор объектов и подготовка материала к фиксации. Требования к материалу и к фиксатору. Основные компоненты фиксирующих смесей и характер их воздействия на органоиды клетки. Ядерные и цитоплазматические, спиртовые и водные фиксирующие смеси. Правила фиксации цитологического материала. Темпоральная фиксация.
Специфика промывки и "проводки" цитологического материала.
Изготовление парафиновых блоков. Резка на микротоме. Последовательность работы на микротоме при изготовлении серии тонких срезов. "Неудачи" при резке и способы их устранения. Правила расправления и монтировки серии парафиновых срезов на предметные стекла.
Другие среды для заливки материала.
Красители, используемые для окрашивания внутриклеточных структур, их свойства и применение. Общая схема окрашивания срезов. Двойная и тройная окраска.
Заключение окрашенных срезов в постоянную среду (схема).
Ускоренные методы цитологического анализа, область их применения. Основные этапы приготовления препаратов.
Предфиксационная обработка. Фиксаторы. Мацерация (ферментативная и кислотная). Окрашивание временных препаратов. Получение монослоя клеток (мазки, давление, раскапывание).
Способы перевода временных препаратов в постоянные. Смесь Гойера.
Методы прижизненного изучения растительных клеток, их значение. Объекты, среды и техника прижизненных наблюдений.
Сравнительный анализ методов изучения живых клеток, сопоставление результатов с наблюдениями фиксированных клеток.
Цитохимические методы и их значение.
Световая микроскопия
Основы теории светового микроскопа и овладение приемами работы, позволяющими максимально реализовать его оптические возможности. Устройство микроскопа. Разрешающая способность. Сухие и иммерсионные системы. Принцип рациональной установки освещения (принцип Келера). Светофильтры и их применение.
Препаратоводитель, бинокулярная насадка, рисовальный аппарат и др. (устройство и принцип действия). Измерительные приборы и измерения. Определение масштаба изображения при зарисовке и микрофотографировании объекта.
Фазово-контрастный микроскоп. Поляризационный и люминесцентный микроскопы. Возможности их применения.
Основы электронной микроскопии
Знакомство с принципами изучения ультраструктуры клетки - фиксация материала и заключение в смолу, ультрамикротомирование и "окраска". Просмотр готового препарата и его фотографирование, описание негатива. Трансмиссионный и сканирующий электронные микроскопы. Сравнительный анализ состава и структуры органоидов клетки как основы для понимания ее функционального состояния.
Составитель - ст. преп. Ильина Г.М.