Д.А. Гудков, Е.Н. Ефременко
Рефолдинг гексагистидинсодержащей органофосфатгидролазы из
телец включения
Реферат
Из клеток E. coli DH 5a
выделены и очищены тельца включения, содержащие органофосфатгидролазу, с
гексагистидиновой последовательностью на N-конце молекулы белка. При исследовании
процесса солюбилизации телец включения были установлены оптимальные условия его
проведения: 6 М мочевины в фосфатно-солевом буфере с pH 7,6; 37њС; 2 ч.
Проведен рефолдинг фермента из растворов солюбилизированных телец включения с
использованием металл-хелатирующей хроматографии. Изучен процесс активации
фермента после проведения рефолдинга. Показано, что максимум активности
фермента может быть достигнут после 24 ч его инкубирования при 4њС в среде с
0,05 М CO32--ионов в присутствии ионов Co2+ (10-5
М).
Полный текст статьи в формате PDF
Вестник Московского Университета.
Химия 2007, том 48, ? 6, стр. 389-394
Copyright (C) Химический факультет МГУ, 2007
|