1. Основные иммунологические понятия. Свойства и функции антител. Структура и общая структурная характеристика иммуноглобулинов, специфичность. Антиген-связывающие центры антител.
2. Физико-химические закономерности взаимодействия антиген-антитело. Методы определения аффинности антител. Равновесный диализ. Методы фракционного осаждения. Методы расчета физико-химических параметров реакции антиген- антитело.
3. Кинетические характеристики взаимодействия антиген-антитело. Экспериментальные методы определения кинетических констант. Определение скоростей комплексообразования с использованием меченых реагентов. Определение константы скорости ассоциации. Определение константы скорости диссоциации.
4. Ферменты как метки в иммуноанализе. Основные физико-химические и кинетические свойства ферментов. Физико-химнческие свойства ферментов, используемых в ИФА. Пероксидаза хрена. Щелочная фосфатаза. Фотометрические, флуоресцентные, хемилюминесцентные субстраты.
5. Получение антисывороток. Структура иммуногена. Адъюванты. Выбор вида животного. Способы иммунизации. Практические процедуры иммунизации и получение антисыворотки. Тестирование антисывороток. Моноклональные антитела.
6. Методы получения конъюгатов для ИФ А- Получение конъюгатов носителей с гаптенами с карбоксильной группой. Получение конъюгатов. белок-фермент. Перйодатный метод Накане. Гомобифункциональные сшивающие агенты. Получение конюъгатов с помощью глутарового альдегида, п-безохинона, малеимидный метод. Гетеробифункциональные сшивающие агенты. Получение конъюгатов с помощью активированных эфиров малеимидных соединений. Получение конъюгатов с помощью пиридилсульфидного метода. Получение конъюгатов гаптен-фермент. Получение конъюгатов ферментов с гаптенами, содержащими карбоксильную группу. Метод смешанных ангидридов. Карбодиимидный метод. Получение конъюгатов гаптенов с ферментами, содержащими аминогруппы. Методы с применением гомо- и гетер о- бифукциональных сшивающих реагентов.
7. Методы иммуноанализа. без использования меченых реагентов. Методы иммуноанализа, основанные на использовании меченых реагентов. Радиоиммунологический анализ. Методы иммуноферментного анализа (ИФА) и их сравнение. ИФА с использованием меченного ферментом антигена. Конкурентный анализ. Метод двойных (вторичных) антител. Метод последовательного насыщения. Методы с использованием меченых специфических антител. Конкурентный анализ с. иммобилизованным антигеном. Сандвич-метод. Методы с использованием меченых антивидовых антител. Твердофазный ИФА с использованием нековалентных комплексов фермента-маркера с антителами. Твердофазный анализ в проточных системах.
8. Теоретические основы ИФА. Закономерности конкурентного анализа. Закономерности сэндвич-анализа. Длительность анализа, предел обнаружения.
9. Биосенсорные устройства, основанные на различных методах детекции. Электрохимические биосенсоры. Полупроводниковые биосенсоры. Оптические квантовые системы (поверхностный плазменный резонанс, диффракционные решетки, эффект полного отражения и т. д.) Амплификационные системы преобразования сигнала.
10. Флуоресцентный анализ. Флуоресцентный иммуноанализ с разрешением во времени, типы используемых меток, типы проведения анализа. Поляризационный флуоресцентный иммуноанализ.
11. Методы представления и обработка экспериментальных данных. Калибровочные графики. Стандартное отклонение, стандартная ошибка, коэффициент вариации, доверительный интервал.

Рекомендуемая литература
1. А. М. Егоров, А. П. Осипов и др. Теория и практика иммуноферментного анализа, М., Высш. шк., 1991
2. Иммуноферментный анализ (ред. Т. Т. Нго, Г. Ленхофф) изд-во Мир., М., 1988.
3. Иммунология (ред. У. Пол), изд-во Мир, Москва, 1988.
4. Структура и функции антител (ред Л. Глинн, М. Стьюард), изд-во Мир, Москва, 1983.
5. Л. А. Остерман. исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами, изд-во Наука, Москва, 1983.
6. Медицинские лабораторные технологии (ред А. И. Карпищенко), т. 2, изд-во " Интермедика, Санкт-Петербург, 1999.
7. Solid Phase Guide (Ed. Vibeke Rowell), Nunc Brand Products, Roskilde, 2001
8. Материалы последних международных выставок и конференций.

Программа составлена
доц. Осиповым А. П.