1. Кинетические основы ферментативных методов анализа.
Классификация кинетических методов анализа. Дифференциальные методы; метод начальных скоростей, метод фиксированного времени, метод варьируемого времени. Интегральные методы. Метод конечной точки. Особенности использования индикаторных реакций первого н второго порядка. Калибровочные кривые, уравнение калибровочных кривых. м етод внутреннего стандарта.
2. Использование ферментов в качестве аналитических реагентов,
Преимущества ферментов как аналитических реагентов специфичность, высокая каталитическая активность, многообразие определяемых веществ. Основные требования к современным методам анализа; правильность, низкие пределы обнаружения, экспрессность.
Методы определения субстратов и. ферментов. Активация и ингибирование. Аналитическое использование эффекта активации. Определение катализатора, активатора. Различные классы ингибиторов;. ферментов и особенности их ферментативного определения. Сопряженные полиферментные системы в анализе.
3. Основные методы индикации cкорocти ферментативных реакций и индикаторные соедцнения и ферменты в анализе.
Понятие об электрохимических, спектрофотометрических, флуорометрических, хемилюминесцентных, биолюминеоцентных методах детекции. Основные индикаторные продукты ферментативных систем; О₂, Н₂О₂, NH₃, НАД(Ф)Н₂, АТФ, ФМНН₂ и сравнение различных методов их детекции. Основные классы ферментов, наиболее часто используемые в анализе, оксидазы, дегидрогеназы, пероксидазы, протеазы, люцифераы, эстеразы. Основные метаболиты и способы их ферментативного определения: аминокислоты, мочевина и ее производные, сахара, спирты, липиды.
4. Иммобилизованные ферменты в анализе.
Реакторы с иммобилизованными ферментами; колонки, трубки, реакторы с полыми нитями, мембранные реакторы. Детектирующие системы с иммобилизованными ферментами и биосенсоры. Оптоволоконные детекторы. Электроаналитические датчики; ферментные электроды, биочипы. Термисторы. Преимущества ферментных детектирующих сис-тем. Проблемы стабильности ферментных датчиков и правильности их работы: чувствительность; соотношение сигнал-шум, время ответа. Различные методы регистрации и обработки аналитических данных.
5. Биолюминесценция и биолюминесцентныи анализ.
Основные хеми - к биолюминесцентные системы: люциферазы светляков и бактерий, люминол-пероксидава. Аналитические возможности этих систем, их преимущества. Принципы определения АТР и использование АТР-метрии в " быстрой" микробиологии, контроле бактериаль-ных загрязнений в биологических образцах, пищевых продуктах, воде. Определение адениновых нуклеотидов. Биолюминесцентные методы определения ферментов (креатинкиназа), антибиотиков. Биолюминогенные субстрат

Рекомендуемая литература
1. Н. Н. Угарова Структура и функции люциферазы светляков. В сб.: Панорама современной химии России. Химическая и биологическая кинетика. Новые горизонты. Т. 2. Биологическая кинетика. - М: Химия, стр. 232-262. (2005)
2. Н. Н. Угарова, Л. Ю. Бровко Взаимосвязь между структурой белковой глобулы и спектрами биолюминесценции люциферазы светляков (обзор). Известия Академии наук, Сер. Хим., ? 10, 1670-1679. (2001)  

Программа составлена
проф. Угаровой Н. Н.