Получение первичной культуры мышиных эмбриональных фибробластов (MEF).

Для получения используются эмбрионы 12 дневного возраста (оптимально). Можно использовать эмбрионы 14 дневного возраста и более, но в этом случае придется более тщательно отделять кожу и внутренние органы.

1. Убить самку хлороформом.
2. Протереть тело спиртом.
3. Вскрыть, вынуть эмбрионы.
4. Переложить эмбрионы в Хенкс с антибиотиком (или в среду).
5. Отрезать у каждого эмбриона голову, конечности, вынуть внутренние органы.
6. Оставшуюся массу крошить ножницами. Чем мельче тем лучше.
7. Переложить гомогенат в трипсин на 30-40 мин, 37°С.
8. Центрифугировать 5 мин при 1000-3000 об/сек.
9. Снять надосдок, долить среды и ресуспендировать.

10. Полученный гомогенат клеток посадить во флакон для культивации (0 пассаж).
11. Сменить среду на следующий день.