Проект РФФИ ?06-04-49017a, 2006-2008 гг., руководитель И. В. Перминова

Взаимодействие гуминовых веществ с биологическими мембранами: количественное описание и механизм

Предлагаемый проект направлен на изучение механизма биологической активности гуминовых веществ, которое включает в себя количественное исследование мембранотропных свойств гуминовых веществ. Теоретическая значимость комплекса предложенных исследований состоит в том, что впервые будут получены прямые данные о проницаемости и сорбционной способности биомембран в отношении ГВ. Ответ на вопрос, проникают ли гуминовые вещества в клетку, является основополагающим для изучения механизмов их биологической активности. Для получения соответствующих данных планируется впервые применить меченные тритием препараты ГВ. В качестве модели биологической мембраны будут использованы цельные клетки кишечной палочки Escherichia coli - грам-отрицательной бактерии, широко используемой в модельных биологических исследованиях. Применение тритиевой метки позволит не только количественно изучить сорбцию ГВ на клеточной биомассе, но и оценить долю сорбированных на клеточной стенке и проникших внутрь клетки ГВ. Помимо цельной клетки, будет изучено взаимодействие ГВ с липополисахаридом (ЛПС) - важнейшим структурным звеном внешней мембраны E. coli. Для разделения сложной системы ГВ - ЛПС, взаимодействие будет проводиться в гетерофазной системе, где ГВ будут ковалентно связаны с поверхностью силикагеля. Иммобилизация ГВ будет проведена с использованием инновационного подхода, предусматривающего введение высокоадгезионных алкоксисилильных групп в структуру ГВ. На основании полученных результатов будет дана количественная оценка взаимодействия ГВ с биомембранами и высказано предположение о механизме этого процесса.