Иcследовали влияние нетилмицина, амикацина, цефтазидима и цефотаксима на адгезивностъ 14 штаммов Lactobacillus spр., 21 штамма Escherichia coli, 15 штаммов Klebsiella pneumoniae, 18 штаммов Enterococcus spp. и 15 штаммов Candida albicans, выделенных из фекалий и дыхательных путей новорожденных детей. В опытах использовали субтерапевтические и терапевтические концентрации следующих антибиотиков: нетилмицин - 1,2 и 12,0 мкг/ мл, амикацин - 1,8 и 18 мкг/мл, цефтазидим - 7,5 и 75 мкг/мл, цефотаксим - 6,5 и 75 мкг/мл. Адгезию С.albicans исследовали на клетках буккального эпителия, остальных микроорганизмов - на формалинизированных эритроцитах человека l(0) Rh(+) группы крови. Установлено, что изучаемые антибиотики ингибируют в терапевтических и субтерапевтических концентрациях адгезивность большинства штаммов исследованных видов микроорганизмов. Наибольшим антиадгезивным эффектом обладают цефалоспорины. С возрастанием концентрации антибиотиков от субтерапевтической до терапевтической увеличивается число штаммов, адгезивность которых ингибируется как цефалоспоринами, так и аминогликозидами. Ключевые слова:
Одним из актуальных направлений современной микробиологии и химиотерапии является изучение адгезивностии микроорганизмов и влияние на этот процесс антибактериальных препаратов. В настоящее время адгезия возбудителя к поверхности эпителия рассматривается как начальный этап его колонизации слизистых оболочек или кожи, который предшествует развитию инвазивных поражений [1-3], Вместе с тем адгезивность обеспечивает стабильное заселение макроорганизма нормальной микрофлорой, создающей экологический барьер для инфекционных агентов [4-6].
Важнейшими факторами, влияющими на активность адгезии микроорганизмов к эпителиоцитам, являются антибактериальные препараты, которые способны блокировать образование стабильной системы "микроб - клетка макроорганизма" за счет изменения гидрофобных свойств поверхности бактериальной клетки, а также в результате повреждения синтеза компонентов клеточной стенки микроорганизмов, включая адгезины [5, 7].
В настоящее время очень важным представляется изучение адгезивности микроорганизмов, выделенных у новорожденных детей, у которых процесс формирования колонизационной резистентности происходит в условиях массивной антибактериальной терапии и активной контаминации микрофлорой окружающей среды. На сегодняшний день практически неизученным остается вопрос о влиянии антибиотиков, широко применяемых в современной неонатологии, на адгезивные свойства представителей нормальной микрофлоры и возбудителей инфекционно-воспалительных заболеваний (ИВЗ) у новорожденных, т.е. возможное положительное или отрицательное участие в формировании воспалительного процесса.
Целью настоящего исследования явилось изучение влияния нетилмицина, амикацина, цефтазидима и цефотаксима на адгезивные свойства различных микроорганизмов, выделенных из фекалий и содержимого дыхательных путей новорожденных детей.
Для исследования адгезивности были использованы: 14 штаммов лактобактерий, выделенных из фекалий (7 штаммов Lactobacillus acidophilus, 5 штаммов L.fermentum, 2 штамма L.plantarum); 21 штамм Escherichia coli - 15 из фекалий и 6 из трахеобронхиальных аспиратов (TБA); 15 штаммов Klebsiella pneumoniae - 10 из фекалий и 5 из ТБА; 18 штаммов Enterococcus и 15 штаммов Candida albicans - вcе из кишечника.
Применяемые в опытах антибиотики использовали в субтерапевтических и терапевтических концентрациях (которые создаются в сыворотке крови при внутривенном введении терапевтических доз изученных препаратов): нетилмицин (нетромицин) в концентрациях 1,2 и 12,0 мкг/мл, амикацин - 1,8 и 18 мкг/мл, цефтазидим - 7,5 и 75 мкг/мл и цефотаксим - 6,5 и 75 мкг/мл соответственно.
Адгезию штаммов кишечной палочки, клебсиеллы, энтерококка, и лактобактерий исследовали на формалинизированных эритроцитах человека 1(0) Rh(+) группы[4], адгезию грибов рода Candida - на клетках буккального эпителия [8].
Адгезивные свойства оценивали по 2 показателям:
1 - по индексу адгезивности микроорганизмов (ИАМ)- числу адгезированных микробов на одном участвующем в адгезивном процессе эритроците или эпителиоците. При этом микроорганизм считали неадгезированным при ИАМ < 1,75, низкоадгезированным - при ИАМ от 1,76 до 2,5, среднеадгезированным - при ИАМ от 2,51 до 4,0 и высокоадгезированным при ИАМ выше 4,0 [5];
2 - пo коэффициенту (К) участия эритроцитов и эпителиоцитов в адгезивном процессе, который представляет собой процент эритроцитов и эпителиоцитов, имеющих на своей поверхности адгезированные микробы [4].
Существенными считали различия между показателями контрольного опыта (с добавлением изотонического раствора хлорида натрия) и опыта с добавлением одного из антибиотиков, которые отличались на 20% и более (р<0,05) [5].
Все исследованные штаммы микроорганизмов, выделенные из организма новорожденных детей, были адгезированными. Их распределение по степени адгезивности представлено в табл. 1. Низкоадгезивные штаммы чаще всего встречались среди лактобактерий и клебсиелл и реже всего среди энтерококков. Большинство же штаммов всех исследованных видов микроорганизмов были среднеадгезивными и высокоадгезивными. Распределение штаммов кишечной палочки и клебсиеллы по степени адгезивности не зависело от локуса их выделения (кишечник и дыхательные пути).
Таблица 1. Распределение штаммов микроорганизмов по степени адгезивности |
Микроорганизмы |
Низкоадгезивные |
Среднеадгезивные |
Высокоадгезивные |
n |
P |
n |
P |
n |
P |
Lactobacillus spp. (n=14) |
6 |
0,43 |
4 |
0,28 |
4 |
0,28 |
Candida albicans (n=15) |
6 |
0,40 |
8 |
0,53 |
1 |
0,07 |
Enterococcus spp. (n=18) |
1 |
0,06 |
8 |
0,44 |
9 |
0,50 |
Klebsiella pneumoniae (n=15) |
7 |
0,47 |
5 |
0,33 |
3 |
0,20 |
Escherichia coli (n=21) |
7 |
0,33 |
8 |
0,38 |
6 |
0,29 |
Примечание: n - число штаммов, Р - частота встречаемости признака.
Результаты исследования влияния антибиотиков на адгезивность микроорганизмов, представленные в табл. 2-4, показали, что все исследуемые антибиотики либо снижали адгезивную способность микроорганизмов, либо не влияли на это свойство.
Таблица 2. Частота встречаемости штаммов со сниженной адгезивностью под влиянием антибиотиков в различных концентрациях |
Антибиотики |
C.albicans (n=15) |
E.coli (n=21) |
K.pneumoniae (n=15) |
Enterococcus spp. (n=18) |
Lactobacillus spp. (n=14) |
n |
P |
n |
P |
n |
P |
n |
P |
n |
P |
Нетилмицин |
СТ |
8 |
0,53 |
15 |
0,71 |
11 |
0,73 |
14 |
0,78 |
6 |
0,42 |
Т |
12 |
0,8 |
17 |
0,81 |
13 |
0,87 |
15 |
0,83 |
9 |
0,64 |
Амикацин |
СТ |
4 |
0,27 |
12 |
0,57 |
9 |
0,60 |
15 |
0,83 |
9 |
0,64 |
Т |
7 |
0,47 |
14 |
0,67 |
13 |
0,87 |
17 |
0,94 |
11 |
0,79 |
Цефотаксим |
СТ |
8 |
0,53 |
16 |
0,76 |
10 |
0,67 |
13 |
0,72 |
12 |
0,86 |
Т |
13 |
0,87 |
18 |
0,86 |
13 |
0,87 |
16 |
0,89 |
12 |
0,86 |
Цефтазидим |
СТ |
13 |
0,87 |
15 |
0,71 |
13 |
0,87 |
15 |
0,83 |
12 |
0,86 |
Т |
14 |
0,93 |
16 |
0,76 |
15 |
1 |
18 |
1 |
13 |
0,93 |
Примечание: СТ - субтерапевтическая концентрация; Т - терапевтическая концентрация; n - число штаммов со сниженной адгезивностью под влиянием антибиотиков, в скобках число изученных штаммов; Р - частота встречаемости штаммов со сниженной адгезивностью под влиянием антибиотиков.
Далее...
Написать комментарий
|