1. ДНК-зонды. Размеры, типы и способы получения. Оптимизация структуры ДНК-зондов, получаемых на основе аминокислотной последовательности.
 2. Метки, используемые для детекции ДНК зондов. Их преимущества и недостатки.
 3. Саузерн и Нозерн-блот анализ. Принципы и особенности
 4. Клонирование генов. Получение геномных и кДНК библиотек.
 5. Вектора, используемые для создания геномных и кДНК библиотек.
 6. Методы скрининга геномных и кДНК библиотек.
 7. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Принцип ПЦР.
 8. ДНК-зонды. Типы, способы получения и области применения.
 9. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Требования к ферментам, используемых в ПЦР.
10. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Выбор праймеров и оптимизация условий ПЦР.
11. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Области применения ПЦР.
12. Назовите ферменты модификации ДНК и РНК и опишите их активности
13. Мутагенез. Направленный и неупорядоченный мутагенез. Преимущества и недостатки каждого из подходов.
14. Принципы и подходы, используемые для повышения эффективности направленного мутагенеза.
15. Секвенирование ДНК. Принципы химического секвенирования.
16. Секвенирование ДНК. Принципы ферментативного секвенирования.
17. Ферменты, используемые для секвенирования и требования, предъявляемые к ним.
18. Типы и способы введения меток при ферментативном секвенировании.
19. Экспрессия рекомбинантных белков в E.coli. Преимущества и недостатки по сравнению с эукариотическими системами экспрессии. Требования, предъявляемые к системам экспрессии рекомбинантных белков.
20. Опишите структурные элементы экспрессионного вектора, необходимые для высокоэффективной экспрессии белков в E.coli.
21. Опишите строение и принцип действия lac-промотора
22. Особенности экспрессии эукариотических белков в E.coli.
23. Преимущества способов получения белков генно-инженерным путем по сравнению с традиционными методами.
24. Какие методы аффинной очистки рекомбинантных белков вы знаете?
25. Секвенирование ДНК. Особенности проведения электрофореза при секвенировании ДНК.
26. Достоинства и недостатки клонирования генов в плазмидах и фагах.
27. Эндонуклеазы рестрикции второго типа. Свойства и особенности механизма действия.
28. ДНК-полимераза I E.coli. Строение и особенности механизма действия.
29. Параметры, характеризующие эффективность ДНК-полимераз.
30. Назовите основные типы ферментов, гидролизующих ДНК и опишите их специфичность.

Рекомендуемая литература
1.: М.Сингер, П.Берг. "Гены и геномы", т.1 и 2, изд-во "Мир",1998
2. А.В.Чемерис, Э.Д.Ахунов, В.А.Вахитов:
   а) химическое секвенирование по Максаму-Гилберту
  б) ферментативное секвенирование по Сенгеру
  г) векторы, используемые в генетической инженерии
  д) секвенирующий электрофорез
3. Savvas C. MAKRIDES Strategies for Achieving High-Level Expression of Genes in Escherichia coli.
    Microbiological Reviews, 1996, vol.60, N 3, p. 512-538. [Full Text PDF file]

Вопросы? Обращайтесь к проф. В.И. Тишкову в комнату 210, тел.32-08.