|
Йочева Л.Д., Антонова-Николова С.К. Биологический факультет Софийского университета им. Св. Кл. Охридского, Болгария
В начало...
(Окончание)
Протопластирование, вероятно, вызывает элиминацию точечных мутаций и ведет у ревертантов УФ-мутанта 695-3-2 к восстановлению соотношения компонентов, характерного для дикого штамма (табл. 2). Среди ревертантов штамма 695-3-2-206 отобраны 2 варианта (Р9 и Р23), синтезирующие четвертый компонент актиномицинового комплекса - соответственно уже обнаруженный у ревертантов штамма 695-Р24 компонент АМ1 (Rf 0,35) или АМ0 (Rf 0,08). У варианта Р9 отмечено соответствующее изменение соотношения компонентов, поскольку количество нового компонента АМ1 сходно с содержанием основного компонента - АМ1. Соотношение основных компонентов А-695 у варианта Р23 близко к таковому у дикого штамма. Остальные ревертанты, несмотря на увеличение количества АМ1 за счет АМ2, сохраняли характерное для родительского штамма 695-3-2-206 соотношение компонентов (см. табл. 2).
| Таблица 2. Соотношение компонентов актиномицинового комплекса у вариантов, полученных после протопластирования штаммов 695-3-2 и 695-3-2-206 |
| N варианта |
Kомпоненты, % |
| АМ1 |
АМ2 |
АМ3 |
Новые с фракции |
| АМ0 |
АМ1 |
| 695 (K1) |
31,23 |
58,63 |
10,14 |
|
|
| 695-3-2 (K2) |
44,49 |
44,83 |
10,68 |
| Р1 |
37,05 |
52,68 |
10,27 |
| Р3 |
42,64 |
47,51 |
9,85 |
| Р4 |
32,98 |
53,68 |
13,34 |
| Р5 |
33,16 |
58,65 |
8,19 |
| Р17 |
31,99 |
56,49 |
11,52 |
| Р21 |
32,93 |
56,60 |
10,47 |
| Р34 |
32,47 |
54,11 |
13,42 |
| Р82 |
39,04 |
46,73 |
14,23 |
| 695-3-2-206 (K3) |
51,83 |
33,46 |
14,71 |
| Р5 |
64,18 |
25,69 |
10,13 |
| Р9 |
31,42 |
25,06 |
12,77 |
30,75 |
| Р11 |
54,20 |
34,17 |
11,63 |
|
| Р23 |
30,10 |
40,66 |
23,54 |
5,70 |
| Р48 |
61,09 |
25,19 |
13,72 |
|
| Р89 |
68,24 |
22,46 |
9,30 |
| Р131 |
64,31 |
25,10 |
10,59 |
| Р132 |
63,59 |
19,01 |
17,40 |
Примечание. Значения Rf для АМ1, АМ2, АМ3, АМ1 см. в примечании к табл. 1, значение Rf для АМ0 - 0,08.
У всех ревертантов штаммов 695, 695-3-2 и 695-3-2-206 наибольшие изменения обнаружены в относительном содержании компонента АМ3, которое у большинства вариантов выше, чем в контроле.
Полученные данные указывают на то, что влияние процессов получения и регенереции протопластов на компонентный состав комплекса А-695 штаммоспецифично. Самая высокая степень вариабельности по признаку антибиотикообразования выявлена у регенерировавших протопластов дикого штамма. Подобные изменения соотношении компонентов после протопластирования отмечали у S.hygroscopicus 155 [12], S.peucetius var. caesius [13], S.albogriseolus 444 [14] и других продуцентов антибиотических комплексов. Среди всех анализируемых ревертантов не обнаружено вариантов, утративших способность к биосинтезу основных компонентов комплекса А-695, но протопластирование штаммов 695-3-2-206 и 695-Р24 приводило к появлению вариантов, синтезирующих новые компоненты антибиотического комплекса. Эти данные можно объяснить, если предположить возможность сочетания имеющихся у штамма 695-3-2-206 мутаций с возникшей в результате протопластирования перестройкой хромосомного аппарата клеток. Аналогичные процессы, возможно, происходят и при повторном протопластировании штамма 695-Р24.
Нельзя полностью исключить также возможности внутриштаммового слияния протопластов и соответственно возможности рекомбинантных процессов, предшествующих регенерации.
Полученные данные показывают, что протопластирование может быть использовано для повышения антибиотической активности штамма S.galbus (F) subsp. achromogenes 695 и селекции вариантов, преимущественно синтезирующих определенный компонент актиномицинового комплекса.
АНТИБИОТИКИ И ХИМИОТЕРАПИЯ, 2000-N4, стр. 10-13.
1. Ogava H., Imai S., Saton A., Kojima M. J Antibiot 1983; 36: 2: 184-186.
2. Захарова Г., Белова Т., Камзолкина О. и др. Антибиотики и химиотер 1988; 33; 3: 217-223.
3. Орлова Т., Волкова Е., Куроедов А. Там же 1988; 33; 7: 486-490.
4. Исаева Л., Воейкова Т. Там же 1990; 35; 2: 27-29.
5. Лаврентьева Г., Овсянко А. Там же 1990; 35; 4: 17-20.
6. Солнышкина Т., Грузина В., Камзолкина О., Даниленко В. Там же 1991; 36: 8: 3-5.
7. Jocheva L., Kominkov L., Antonova-Nikilova S. Comp rend de L'Acad. Buigare des Sci 1996; 49: 17-21.
8. Йочева Л. Канд. дисс 1996; 261.
9. Okanishi M., Suzuki K., Umezawa H. J Gen Microbiol 1974; 80: 389-400.
10. Horwood D., Bibb M., Сhater K. et al. Genetic Manipulation of Streptomyces: A Laboratory Mannual. Norwich, England 1985; 356.
11. Rachev R., Sachanekova M., Darakchieva M. et al. Acta Microbiol Bulgarica 1987; 21: 57-61.
12. Иванова И., Христова К., Тишков С., Мончева П. Антибиотики и химиотер 1992; 37; 11: 3-5.
13. Красильникова О., Анисова Л., Романова Н., Бартошевич Ю. Там же 1988; 33; 7: 483-486.
14. Аntonova-Nikolova S., Ivanova I. Beijerinck centennial microbial physiology and gene regulation: emerging principales and applications./ W.A. Scheffers and J.P. van Dijken eds. 1995; 253-254.
Написать комментарий
|
