Документ взят из кэша поисковой машины. Адрес оригинального документа : http://www.abitu.ru/en2002/closed/viewwork.html?work=205 Дата изменения: Fri May 5 15:25:17 2006 Дата индексирования: Tue Oct 2 02:35:01 2012 Кодировка: koi8-r Поисковые слова: arp 220

Научная работа


« Исследование токсического действия акрилонитрила на различные изоферменты
цитохрома Р450 »




Автор


Учащийся 2 курса


химико-биологического профиля


областного многопрофильного


лицея «Эрудит»


Савсуненко Александр Олегович


sashasavsunenko@ua.fm








Научный руководитель


Кандидат биологических наук,


Доцент Донецкого Государственного


Медицинского Университета (ДГМУ)


Ткаченко Лилия Николаевна


















Донецк, 2002


Содержание

Введение 3

1. Обзор литературы 4
1. Роль протогема и протеинового окружения в структуре, спектре и
функциях цитохрома Р450 4

1. Общие сведения о цитохроме P450 4
2. Изоферменты цитохрома Р450 5
3. Полиморфизм CYP450 5
4. Ингибиторы и индукторы CYP450 6
5. Переработка ксенобиотиков 7
2. Общие сведения об акрилонитриле 7
1.2.1 Физико-химические свойства 7
1.2.2 Поглощение, переработка и выведение организмом 8
1.2.3 Биотрансформация в печени 9
2. Практическая часть 11
3. Выводы 14
4. Направления дальнейших исследований 15
5. Литература 16





















Введение

Одной из основных наиболее перспективных областей развития биохимии
является исследование и попытки использования важнейших соединений -
цитохромов. Они обнаружены в клетках бактерий, животных и растений: спектр
их функций в организме очень велик. Главная функция - перенос электронов
при окислительном фосфорилировании. Цепь из 6 цитохромов играет роль тех
"энергетических ступенек" благодаря которым электрон понижая свой
энергетический уровень способен восстановить несколько молекул АТФ, а не
одну молекулу [1]. Также цитохромы участвуют в биомодификации и перекисном
окислении липидов поступающих в организм [2]. Представляет несомненный
интерес рассмотрение ещё одного очень важного свойства цитохромов -
микросомального окисления, происходящего в печени. Это свойство
обеспечивает защитную функцию организма при отравлениях. Изучение свойств
цитохромов полезно рассмотреть во взаимодествии с одним из канцерогенов,
отравляющим веществом и сильным ксенобиотиком - акрилонитрилом, который
может поступать в окружающую среду при производстве, переработке,
использовании, хранении, транспортировке и захоронении отходов производства
полиакрилонитрила. Акрилонитрил вызывает рак у животных и, по результатам
некоторых исследований, у человека, поэтому ВОЗ не устанавливает
безопасного уровня для его содержания в окружающей среде [3]. Пользуясь
данными исследования веществ, структурно сходных с акрилонитрилом [4],
можно предположить, что он нейтрализуется в микросомах печени с участием
цитохрома P450. Целью данной работы является исследование процесса
окисления акрилонитрила в печени, идентификация типа цитохромов,
вовлеченных в него, и поиск наиболее эффективного средства борьбы с
хроническими и острыми поражениями акрилонитрилом.











Обзор литературы


1.1. Роль протогема и протеинового окружения в структуре, спектре и
функциях цитохрома Р450.


1.1.1. Общая информация.

Гемопротеины - класс биологических соединений, имеющих уникальный
активный центр: железо-протопорфириновый(XI) комплекс (приложение 1). Этот
комплекс является практически независимой плоской молекулой, соединенной с
основной частью цитохрома - глобулярным белком, одной или двумя
ковалентными связями, которые являются осевыми лигандами у атома железа
(приложение 2). Таким образом, это соединение состоит из трех ковалентно
связанных частей: атом железа, порфириновый макроцикл, и осевые лиганды
соединенные напрямую с железом. Существует большое количество
экспериментальных доказательств того, что обнаруженные спектроскопические
свойства и функции этого вещества напрямую связаны с этим порфириновым
комплексом [5].
Уникальной особенностью гемопротеинового комплекса является наличие
сопряженного облака электронов между тремя компонентами системы. В
частности, порфирин обладает электронной плотностью присущей
высокоделокализованной системе, в которой легко смещается электронная
плотность [6], благодаря чему железо может легко менять свои степени
окисления.
Спектр реакций окисления, катализируемых цитохромами, очень широк. При
взаимодействии цитохромов с восстановителями типа NADPH*H+ или NADH*H+ и
молекулярным кислородом, образуются вода и железо-кислородные комплексы,
способные окислять многие органические вещества [7].
Гидроксилирование алкильных заместителей - одна из основных реакций
протекающих в организме.
RH + O2 + 2e- + 2H+ > ROH + H2O (1)
Уникальна и термодинамика этого процесса. Энергия диссоциации связи С-Н
96, 99 и 101 ккал/моль для третичных, вторичных и первичных атомов
соответственно [8].
Ранние взгляды на механизм процесса гидроксилирования предполагали,
что происходит сначала образование высоковалентного гем-кислородного
соединения (уравнение 2), а потом происходит перенос кислорода по механизму
внедрения (уравнение 3). Позже этот механизм получил название "кислородной
перегруппировки" и был подтвержден Грувсом и сотрудниками [9].
[pic](2)
[pic](3)


1.1.2. Изоферменты цитохрома Р450.

Существует много изоформ (изоферментов) цитохрома Р450. Они
классифицируются по своим аминокислотным последовательностям. Общепринятая
классификация :
- Типы. Цитохромы одного типа имеют около 40% одинаковых аминокислот.
Существует как минимум 74 типа, из них 17 обнаружены у млекопитающих.
- Подтипы. Члены одного подтипа должны иметь как минимум 55%
одинаковых аминокислот. Около 30 подтипов найдено у человека.
- Индивидуальные гены. Известно около 50 значимых генов, кодирующих
цитохромы, в организме человека.
Международная номенклатура цитохромов [10]:
CYP - цитохром.
- Цифра после аббревиатуры означает номер типа. К примеру: CYP3,
CYP13.
- Буква после цифры - подтип. К примеру: CYP3A, CYP5C.
- Ещё одна цифра означает индивидуальный ген. К примеру: CYP2G1.

1.1.3. Полиморфизм CYP 450.

У разных людей, разных популяций активность цитохромной системы
различна. Генетические различия разных популяций, у которых каждый ген
встречается с частотой как минимум 1%, называется полиморфизмом. Это
явление играет большую роль в клинической практике: не редки случаи, когда
лекарства, действующие на одну группу людей, совершенно не эффективны для
другой группы [11].
Например, цитохром CYP2D6 представлен в виде 2 модификаций. В одной
модификации он постоянно пребывает в индуцированном состоянии, и благодаря
этому почти мгновенно перерабатывает большинство антидепрессантов и
нейролептиков (но в то же время кодеин поступающий в организм мгновенно
превращается в морфин!). Другая модификация не индуцируется, поэтому на
организм, содержащий эту модификацию, не воздействуют ни кодеин, ни
антидепрессанты.

1.1.4 Ингибиторы и индукторы CYP 450.

Многие лекарственные препараты способны ускорять синтез и увеличивать
активность ферментов, катализирующих превращения других лекарственных
веществ, и уменьшать период полувыведения препаратов. Стимуляция
метаболизма - обратимый процесс. После отмены индуктора период
полувыведения возрастает, и уровень лекарственного вещества в крови
достигает исходного значения или даже превышает его. [12]
Хорошо изучено индуцирующее действие фенобарбитала, рифампицина и
фенитоина (дифенина), применение которых может сопровождаться снижением
фармакологической активности других препаратов. Так, фенобарбитал снижает
антикоагуляционное действие варфарина, что заставляет увеличивать дозу
последнего при их совместном назначении. При отмене фенобарбитала
метаболизм варфарина возвращается к исходному уровню; при этом
антикоагулянт, применяемый больным в большой дозе, может вызвать
кровотечение. Индукция ферментов под влиянием других препаратов является
причиной кровотечений при приеме антикоагулянтов в 14% случаев.
К настоящему времени установлено, что индукцию ферментов могут вызывать
барбитураты, глютетимид, дихлоралфеназон, гризеофульвин, фенитоин,
клофибрат.
Индукторы ферментов микросомального окисления могут ускорять метаболизм
эндогенных веществ. Так, фенобарбитал повышает биотрансформацию
биллирубина, витаминов K и D. Снижение уровня кальциферола (витамина D)
может привести к нарушению кальциевого метаболизма и спонтанным переломам
костей у лиц пожилого и старческого возраста, длительно получающих
снотворные средства. Фенитоин ускоряет метаболизм глюкокортикоидов,
тестостерона и тироксина. Предпринята попытка использовать препараты-
индукторы, в частности зиксорин, при заболеваниях печени, желтухе
новорожденных.
Некоторые лекарственные средства способны подавлять синтез и активность
ферментов, участвующих в метаболизме других лекарственных средств. Непрямые
антикоагулянты, изониазид, фенилбутазон, метилфенидат, дисульфирам,
сульфафеназол угнетают биотрансформацию противосудорожного средства
фенитоина и нередко вызывают проявление его токсического действия. При
одновременном применении толбутамида и фенилбутазона, непрямых
антикоагулянтов, первый вызывает гипогликемию даже в обычных
терапевтических дозах. Известны случаи смерти при одновременном назначении
больным азатиоприна или 6-меркаптопурина, которые метаболизируются
ксантиноксидазой, и аллопуринола, который ингибирует этот фермент.
Циметидин подавляет метаболизм варфарина и антипирина.
Способность ряда препаратов нарушать метаболизм других лекарственных
веществ иногда используется в медицинской практике. Примером тому является
применение дисульфирама при лечении алкоголизма. Этот препарат блокирует
разрушение ацетальдегида, накопление которого в крови вызывает у человека
неприятные ощущения. Подобным образом действуют метронидазол и производные
сульфомочевины.
Угнетение биотрансформации одного лекарственного вещества другим
возможно и в тех случаях, когда в метаболизме обоих веществ участвуют одни
и те же ферменты. Однако клиническое значение такого рода конкурентных
взаимоотношений препаратов пока окончательно неясно.

1.1.5.Переработка ксенобиотиков.

Среди всех многочисленных типов CYP, выделяют несколько отвечающих за
переработку ксенобиотиков. Среди них и представляет интерес поиск
цитохрома, детоксицирующего акрилонитрил. Каждый вид CYP имеет свои
индукторы и свои ингибиторы.(Приложение 3)

1.2. Общие сведения об акрилонитриле


1.2.1. Физико-химические свойства

Акрилонитрил (рисунок 2)- при нормальных условиях - бесцветная жидкость
с легкоразличимым запахом горчицы. Растворимость в воде 7.5 грамм на 100 г
воды. Растворим в большинстве органических растворителей. Мировое
потребление акрилонитрила в 1999 г. составило, согласно данным компании ВР
Amoco Chemicals, 4,8 млн. т. Акрилонитрил используется как мономер в
производстве искусственных волокон, полимеров и резины, а также в
промышленности органического синтеза. Кроме
Рисунок 2 применения акрилонитрила как мономера при производстве
резин и упаковок для товаров, он применяется как мощный инсектицид.
Несмотря на то, что он запрещен для использования на продуктах питания, его
продолжают применять при выращивании зерновых, сухофруктов, табака,
используют как "точечный инсектицид" на мельницах и в хлебопекарнях для
уничтожения насекомых в муке [13].
Кроме непосредственных выбросов в атмосферу при производстве и
промышленном использовании, возможны потери акрилонитрила вследствие
аварий, сбоев в работе оборудования и несоблюдения технологии и правил
работы. Основной источник поступления акрилонитрила с воздухом - его
производство. Время полураспада в воде 5-7 дней, однако аварийное
поступление акрилонитрила в грунтовые воды может повлечь за собой
многолетнее их загрязнение. Несмотря на принимаемые меры по очистке, в
пищевые продукты (особенно масло, маргарин) акрилонитрил может поступать из
полимерных контейнеров и упаковочных материалов, состоящих из сополимеров
акрилонитрила. Акрилонитрил легко всасывается через неповрежденную кожу.

1.2.2.Поглощение, переработка и выведение организмом

Общая схема трансформации акрилонитрила приведена на схеме 1.

Единичная оральная доза 0.1мг/кг и 10мг/кг 14С-акрилонитрила была
введена Схема 1 крысам-самцам, при этом
95% было усвоено сразу и 5% выведено через 1 час с фекалиями. В зависимости
от дозы 32,4% и 66,7% соответственно помеченного углерода было выведено с
мочой в следующие 72 часа[15].
На основании опытов, проведенных на разных животных, тип токсического
воздействия акрилонитрила был признан эквивалентным действию синильной
кислоты [16]. HCN была обнаружена в крови крыс после 7 часов их пребывания
в атмосфере с содержанием акрилонитрила 10 мг на 1м3, однако в не
смертельных дозах (1 микромоль/100 мл). У собак же результат оказался в 10
раз выше. При меньших
содержаниях акрилонитрила HCN не обнаруживалась. Таким
образом, было предложено распознавать хронические отравления у рабочих
путем качественной реакции на тиоцианат [17].
С другой стороны, часть ученых утверждает, что механизмы действия
синильной кислоты не имеют ничего общего с действием акрилонитрила. После
введения акрилонитрила свиньям, кроликам и крысам, цианид был выведен с
мочой, в виде тиоцианата и в количествах значительно меньших, чем при
отравлении синильной кислотой. После подкожного введения акрилонитрила
свиньям в количестве 130мг/кг, количество синильной кислоты в крови
составило 0.128 ?. Для сравнения: после отравления свиней HCN путем
ингаляции содержание её в крови составило 1.2?.[18].
Применение тиосульфатов, нитритов и глюкозы в качестве противоядия не
дало значимого эффекта. [19]. Больше информации о поисках противоядия в
литературных источниках не обнаружено.
Детальное изучение острых отравлений акрилонитрилом после
внутривенного введения его собакам и кроликам показало принципиальные
отличия от отравления HCN. Доминирующими нарушением являются нервные
расстройства. Энцефалограммы показывают, что повреждаются центры высшей
нервной деятельности. Важным отличием от отравления цианидами является
повышение поглощения кислорода на первых стадиях отравления и понижение
количества HbO2 в венозной крови. [20]

1.2.3. Биотрансформация в печени

В моче крыс, подвергнутых введению 30мг/кг акрилонитрила были
обнаружены тиоцианат и N-ацето-S(2-цианоэтил)цистеин. [21]. Методом газовой
хроматографии были обнаружены следы цианоэтанола и цианоуксусной кислоты.
Акрилонитрил обнаружен не был. Однако имеются данные об обнаружении
чистого акрилонитрила в крови у рабочих заводов, работающих с
акрилонитрилом, и предлагается контролировать его содержание в крови с
целью выявления хронических интоксикаций.
Используя 14С метку на разных частях молекулы, Kopecky показал основной
путь метаболизма акрилнитрила у крыс: через глицидонитрил к цианиду и
тиоционатам.
Этот путь был подтвержден в условиях in vitro на печени крыс.
Образование цианидов оказалось связано с P-450-зависимой оксидазной
системой . Путем гомогенизирования и хроматографии продуктов взаимодействия
микросом печени и акрилонитрила были выделены следующие продукты:
цианоуксусная кислота, цианоэтанол и уксусная кислота [22].

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

В экспериментах использовали 22 белых беспородных крыс- самок (150-200
г). Акрилонитрил вводили однократно, внутрибрюшинно в дозе 80 мг/кг в виде
5%-ного раствора [23]. Индукцию различных форм цитохрома проводили
различными медицинскими препаратами[24]:
|Препарат |Доза |Цитохром |Воздействие |
|Омепразол |30 мг / кг |CYP1A2 |Индуктор |
| | |СYP2D19 |Ингибитор |
|Норфолкоксацин |30 мг/ кг |CYP1A2 |Ингибитор |
|Эритромицин |45 мг/ кг |CYP3A3/4/5 |Ингибитор |
| | |CYP2D6 |Ингибитор |
| | |СYP2C9 |Индуктор |
|Верапамил |35мг / кг |CYP3A3/4/5 |Ингибитор |
| | |CYP2D6 |Ингибитор |
|Лидокаин |5мг / кг |CYP3A3/4/5 |Индуктор |
|Кофеин |12 мг / кг |CYP1A2 |Индуктор |
|Дильсульфирам |120 мг / кг |CYP2E1 |Ингибитор |
| | |СYP2C9 |Ингибитор |
|Пропранолол |20 мг / кг |CYP1A2 |Ингибитор |
| | |CYP2D6 |Ингибитор |

Состояние центральной нервной системы и детоксикационной активности
печени оценивали в гексеналовом тесте [25].
Результаты гексеналового теста в условиях различного состояния
цитохрома:



|Серия |Время |Время |
| |засыпания, |сна, мин|
| |мин | |
|Контроль[150 мг/кг] |1,80 |LD |
|Контроль[75 мг/кг] |2,40 |18,20 |
|Акрилонитрил + контроль[75 мг/кг] (через 24 часа) |2,35 |16,48 |
|Акрилонитрил + контроль[75 мг/кг] (через 2 часа) |2,35 |14,30 |
|Акрилонитрил + контроль[75 мг/кг] (через 1 час) |2,35 |16,90 |
|Акрилонитрил (500 мг/кг) |145 |LD |
|Кофеин + контроль[75 мг/кг] |4,5 |13,62 |
|Омепразол + контроль[75 мг/кг] |2,85 |14,87 |
|Верапамил + контроль[75 мг/кг] |2,6 |23,12 |
|Эритромицин + контроль[75 мг/кг] |2,35 |20,50 |
|Норфолкоксацин + контроль[75 мг/кг] |2,5 |20,14 |
|Лидокаин + контроль[75 мг/кг] |1,6 |18,3 |
|Пропранолол + контроль[75 мг/кг] |4,6 |15,4 |
|Акрилонитрил + кофеин (сразу)+ контроль (через 1 |2,76 |32,80 |
|часа)[75 мг/кг] | | |
|Акрилонитрил + кофеин (через 10 мин)+ контроль |2,20 |17,30 |
|(через 1 часа)[75 мг/кг] | | |
|Акрилонитрил + кофеин (через 40 мин)+ контроль |2,80 |12,20 |
|(через 2 часа)[75 мг/кг] | | |
|Кофеин + акрилонитрил + контроль (через 2 часа)[75 |2,34 |30,75 |
|мг/кг] | | |
|Акрилонитрил (250 мг/кг) + кофеин (через 120 мин, |1,80 |480,00 |
|40 мг/кг)+ контроль (через 2 часа)[150 мг/кг] | | |
|Акрилонитрил (300 мг/кг) + кофеин (через 120 мин, |16,67 |LD |
|20 мг/кг)+ контроль (через 2 часа)[150 мг/кг] | | |
|Акрилонитрил + кофеин (через 30 мин) и пропранолол |3,3 |17,49 |
|(10 мг/кг) + контроль (через 2 часа)[75 мг/кг] | | |

Исследуя полученные данные, можно сделать вывод о том, что акрилонитрил
является индуктором цитохрома CYP1A2 (уменьшается продолжительность времени
гексеналового сна).
Как самый сильный из доступных индукторов был выбран кофеин. Дальнейшие
опыты позволили найти концентрацию смеси кофеина и пропранолола,
возвращающие время сна в норму, что говорит о полном восстановлении
цитохромной системы. Интерпретируя результаты последней серии, можно
сказать что акрилонитрил в такой дозе способен переработаться за 2 часа на
фоне индукции цитохрома кофеином. Это показывает, что кофеин, индуцировав
цитохром, позволяет быстрее переработать акрилонитрил и инициировать его
выведение из организма.
Таким образом, можно предложить назначать кофеин и смеси с небольшим
количеством пропранолола или каким-либо другим бета-адреноблокатором в
случае острого отравления акрилонитрилом с целью более быстрой переработки
и выведения токсичных веществ.
ВЫВОДЫ
На основании полученных данных можно сделать следующие выводы:
1. Акрилонитрил индуцирует и ускоряет работу цитохрома CYP1A2 и,
предположительно, CYP2D6.
2. Для восстановления в кратчайшие сроки нормальной деятельности
печени после острого отравления акрилонитрилом можно предложить
введение кофеина.
3. Для уменьшения побочных эффектов действия кофеина , можно
предложить вводить пропранолол (в частности для снижения нагрузки
на сердце).

НАПРАВЛЕНИЕ ДАЛЬНЕЙШИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Направления дальнейших исследований чрезвычайно широки. К сожалению,
найденный антидот в клинических условиях способен вызвать огромные побочные
эффекты. Ближайшими целями являются: детальное исследование механизмов
реализации токсических эффектов акрилонитрила вне печени, и дополнение
антидота веществами сводящими к минимуму эти эффекты, разработка отдельного
направления - хронические отравления акрилонитрилом у рабочих заводов и
поиск мер препятствующих накоплению вредных продуктов биотрансформации в
организме, разработка экспресс - тестов на присутствие акрилонитрила и его
производных в атмосфере и в крови млекопитающих. К сожалению некоторые из
этих направлений трудно осуществимы, без более серьезной базы, некоторые-же
почти завершены - в частности, создание экспресс-тестов.
























ЛИТЕРАТУРА
1. Ленинджер А. Основы биохимии; 1 т. М.: Мир, 1985
2. Ленинджер А. Основы биохимии; 3 т. М.: Мир, 1985.
3. William Johnson, Goro Toki. CEH Report Acrylonitrile. SRI Consulting.
November, 2001.
4. Ingelman-Sundberg. Polymorphic cytochrome P450 enzymes: an opportunity
for individualized drug treatment; Trends in Pharm Sci, Aug. 1999,
342.
5. Chang G.W. & Kam P.C.A. The physiological and pharmacological roles of
cytochrome P450 isoenzymes; Anaesthesia, 1999, 54, 42.
6. Cupp M.J. and Tracy T.S. Cytochrome P450: New Nomenclature and
Clinical Implications; Amer. Fam. Phys. - 1998, 57.1, 107-116.
7. Thummel K.E. & Wilkinson G.R. In vitro and in vivo drug interactions
involving human CYP3A. Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. - 1998, 38, 389-
430.
8. Campbell W.B. & Harder D.R. Endothelium-derived hyperpolarizing
factors and vascular cytochrome P450 metabolites of arachidonic acid
in the regulation of tone. Circ. Res. March. - 1999, 84, 484-8
9. Scheidt W. R.; Cohen I. A.; Kastner M. E. Biochemistry 1979,18, 3546.
10. Doray B., Chen C.-D. and Kemper B. N-terminal deletions and His-tag
fusions dramatically affect expression of cytochrome P450 2C2 in
bacteria. Arch. Biochem. Biophys. In press.- 2001.
11. Liu S., Rivera-Rivera I., Bredemeyer A.J. and Kemper B. Functional
analysis of the phenobarbital-responsive unit in rat CYP2B2. Biochem.
Pharm.- 2001
12. Kim J., Min G., and Kemper B. Chromatin assembly enhances binding to
the CYP2B1 phenobarbital-responsive unit (PBRU) of nuclear factor-1
(NF-1), which binds simultaneously with constitutive androstane
receptor (CAR)/retinoid X receptor (RXR) and enhances CAR/RXR mediated
activation of the PRBU. 2001.
13. Szczesna-Skorupa E. and Kemper B. Endoplasmic reticulum retention
determinants in the transmembrane and linker domains of cytochrome
P450 2C1. J. Biol. Chem. - 2001. 275:19409-19415.
14. Kim J., Rivera-Rivera I. and Kemper B. Tissue-specific chromatin
structure of the phenobarbital-responsive unit and proximal promoter
of CYP2B1/2 and modulation by Phenobarbital. Nucleic Acids Res. -
2001. 28: 1126-1132.
15. Вольф-Хаген Шунк, Цитохром Р450 - зависимый метаболизм арахидоновой
кислоты у нормо- и гипертензивных мышей. - Центр молекулярной медицины
Макса Дельбрюка.
16. Kim J., Rivera-Rivera I. and Kemper B. Tissue-specific chromatin
structure of the phenobarbital-responsive unit and proximal promoter
of CYP2B1/2 and modulation by Phenobarbital. Nucleic Acids Res. .
-2000. 28: 1126-1132.
17. Hems R., Ross B.D., Berry M.N., Krebs H.A. Biochem.J. - 1966 -284-292
18. Doray B., Chen C., and Kemper B.Substitutions in the C-terminal
portion of the catalytic domain partially reverse assembly defects
introduced by mutations in the N-terminal linker sequence of
cytochrome P450 2C2. Biochemistry - 1999 37:12180-12186.
19. Szczesna-Skorupa E., Chen C., Rogers S. and Kemper B. Mobility of
cytochrome P450 in the endoplasmic reticulum membrane. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA-1999 95: 14793-14798.
20. Эмель Аринк. Биотехнология и мониторинг загрязнений: использование
белка цитохрома Р450 1А и ассоциированной индукции ферментов как
биомаркеров в водной среде. Ближневосточный технический университет
(Турция)
21. Mizutani Y.; Hashimoto S.; Tatsuno Y.; Kitagawa T. J. Am. Chem. Soc.
1990, 112, 6809.
22. Oertling W. A.; Salehi A.; Chang C. K.; Babcock G. T. J. Phys.Chem.
1989, 93, 1311.
23. Романова Т.А. Участие цитохром P450- зависимой системы в
биотрансформации в реализации токсических эффектов акриламида. -
Вопросы медицинской химии . - 2000, ?2
24. Ньюсхолм Э., Старт К. Регуляция метаболизма - 1977 -Мир
25. Сперанский С.В. Гигиена и санитария ?7 -1980 С. 50-52