Д.А. Гудков, И.В. Лягин, В.В. Верхуша, Е.Н. Ефременко
Новые
гибридные белки с активностью органофосфатгидролазы и флуоресценцией белка
deGFP4
Реферат
Разработаны новые генетические
конструкции, кодирующие синтез гибридных белков, обладающих
органофосфатгидролазной активностью и свойствами аналога зеленого
флуоресцентного белка с pH-чувствительной флуоресценцией. Установлено, что для
получения максимального выхода гибридных белков в растворимой активной форме в
клетках E. сoli необходимо 0,1 мМ индуктора биосинтеза и 10 ч культивирования после индукции синтеза белков. Достигнутый уровень синтеза одного из
новых белков в растворимой активной форме оказался в 2-25 раз выше выходов в
растворимой форме гибридных белков-аналогов, известных из литературы.
Установлено, что органофосфатгидролаза в составе гибридных белков обладает
характеристиками (рН-оптимум действия, термостабильность, субстратная
специфичность и каталитическая эффективность действия), отличными от
соответствующих характеристик, известных для нативного фермента. Показано, что
флуоресценция зеленого флуоресцентного белка, находящегося в составе гибридных
белков, зависит от pH среды аналогично индивидуальному белку. На примере одного
из гибридных белков показана взаимозависимость его флуоресцентных характеристик
и OPH-активности, проявляющейся в реакциях гидролиза фосфорорганических
соединений.
Полный текст статьи в формате PDF
Вестник Московского Университета.
Химия 2011, том 52, ? 2, стр. 113-121
Copyright (C) Химический факультет МГУ, 2011
|